Caterina Sforza byla hraběnkou z Forli a Imola, dcera Galeazzo Maria Sforza. Vdala se za papeže Girolama Riario avšak jen na pouhých 14 let. 

Mario Auditore je starší bratr Giovanniho Auditore a strýc Ezia. Stejně jako jeho bratr i on je Assassin, ale dává přednost boji ve skupinách.

Maria Auditore byla manželkou Giovanniho Auditore, prominentního Florentského bankéře a člena Řádu vrahů.Je matkou tří synů - Federica, Ezia a Petruccia - a dcery Claudie.

Rodrigo Borgia byl velmistrem řádu Templářů během renesance v Itálii.

Claudia Auditore je sestra Ezia, Federica a Petruccia. Dcera Giovanniho a Marie Auditore. Je chytrá a laskavá, ale poněkud ještě dětská.

Ezio Auditore je hlavní postavou této hry.

Cesare byl velmi inteligentní muž, studoval práva a ve svých pouhých osmnácti let se stal kardinálem. Měl neuvěřitelnou touhu po moci. 

Lucrezia Borgia byla nelegitimní dcerou Rodriga Boriga a mladší sestra Cesare Boriga. Byla členkou templářského řádu, a vévodkyní.